真空离心浓缩仪在寡核苷酸合成中的应用

真空离心浓缩仪在寡核苷酸合成（Oligo Synthesis）中扮演着至关重要的角色，是连接“合成"与“纯化"的关键环节。

寡核苷酸合成（固相亚磷酰胺法）是一个多步循环过程，每一步都涉及化学试剂的添加、反应和洗涤。合成的最终产物通常存在于含高浓度氨水、有机溶剂（如乙腈）或缓冲盐的溶液中。在进入纯化（如HPLC、PAGE、LC-MS）和后续应用（如PCR、基因组装、药物递送研究）之前，必须：

1、去除高浓度氨水

脱保护副产物和溶剂，未除尽的氨水会干扰后续的纯化分离和质谱检测。

2、移除有机溶剂

残留的乙腈等有机相会影响色谱柱分离效果和质谱离子化效率，导致信号抑制或峰形异常。

3、浓缩样品

合成后的粗品溶液体积通常较大（数毫升），需浓缩至小体积（微升级）以适应纯化仪器的上样量（如HPLC进样环体积，通常为50-500 μL）。

传统方法（如氮气吹扫、旋转蒸发）存在处理通量低、易暴沸导致样品飞溅、或高温导致长链Oligo（>50mer）断裂降解的缺陷。而真空离心浓缩仪通过结合 离心力、真空和可控加热，能很好地解决这些问题。

离心浓缩技术的优势

真空离心浓缩仪在寡核苷酸合成中的核心优势，在于它能够以温和、高效且无交叉污染的方式，完成从粗产物到纯化前样品的关键过渡。它利用真空环境显著降低氨水和有机溶剂的沸点，从而在低温（通常低于40℃）条件下快速蒸发溶剂，这很好地保护了对热敏感的寡核苷酸（特别是长链和带有荧光标记的序列）免受降解。同时，其高通量设计能兼容96孔板或离心管，一次运行即可处理数十至数百个样品，大幅提升了从合成到纯化的整体通量。更重要的是，运行过程中离心力确保样品始终安稳地沉积于管底，有效防止了溶剂暴沸引发的样品飞溅和交叉污染，为后续获得高纯度的寡核苷酸产品提供了坚实保障。

1、温和浓缩

在真空环境下，氨水和乙腈/水共沸物的沸点大幅降低，可在室温至40℃的低温环境下快速蒸发溶剂，保护对热敏感的合成产物（特别是带有荧光标记或磷酸化修饰的Oligo），防止其降解。

2、高通量处理

适配96孔板或384孔板，可在单次运行中浓缩成百上千个样品，大幅提升合成与纯化的通量。

3、防交叉污染

离心力使样品始终沉积于管底，溶剂蒸汽被冷阱捕获，有效防止了暴沸导致的样品交叉污染。

4、兼容性强

可轻松处理含有机溶剂（乙腈、氨水）和水相的混合溶液。

应用流程

在寡核苷酸固相合成与氨水脱保护完成后，首先将含有目标产物、氨水及有机溶剂的粗品溶液转移至真空离心浓缩仪专用的离心管或96孔板中；随后，设备在真空环境下通过温和加热（通常低于40℃）快速蒸发去除体系中的氨水和乙腈等挥发性溶剂，使样品浓缩至微升级体积；浓缩后的样品即可直接用于HPLC或PAGE进行纯化分离；最后，将纯化后收集的目标产物馏分再次置于浓缩仪中，去除含水流动相，以获得干燥的寡核苷酸粉末或高浓度溶液，用于后续定量、质检及下游生物学应用。

1、合成与脱保护

合成完成后，用氨水将寡核苷酸从CPG载体上切割下来，同时脱除碱基保护基。

2、初次浓缩

将粗产物溶液置于真空离心浓缩仪中，去除大部分氨水和有机溶剂。

3、纯化

浓缩后的样品即可用于HPLC或PAGE进行纯化。

4、二次浓缩

纯化后的收集馏分（含目标Oligo的水溶液）再次进行离心浓缩，去除流动相，得到干燥的寡核苷酸粉末或高浓度溶液，用于后续冻干或直接使用。

富睿捷离心浓缩仪

富睿捷真空离心浓缩设备可同时处理多个样品，无需担心交叉污染。系统内程序可设定至多30个，主机配备样品在线成像系统，可在运行过程中观察样品浓缩状态，并根据不同的样品对整机的真空度进行调节。设备采用皮拉尼真空计可实时显示腔体内的真空度，并保证真空度的真实性。根据不同的样品可对整机转速进行调节，配备实验室智能互联及远程操控系统及智能云端故障排查系统，手机app可直接操控机器对主机远程进行腔体预热，温度和真空度以及转速可实时在app显示。