离心浓缩仪在DNA/RNA浓缩中的应用

离心浓缩仪在DNA/RNA浓缩中展现出显著的技术优势，成为分子生物学研究的关键工具。该设备通过真空负压（50-100 mbar）降低溶剂沸点，配合温和加热（30-40℃）和离心力（1000-1500 rpm）三重作用，可在30-60分钟内高效浓缩微量核酸样品（50μL→5μL），同时保持DNA/RNA完整性（回收率≥95%）。其封闭式设计有效防止气溶胶污染，支持96孔板高通量操作，显著优于传统乙醇沉淀法（节省60%时间且避免盐分残留）。典型应用于NGS文库构建、PCR产物纯化等场景，尤其适合珍贵样本处理，如单细胞转录组测序中的cDNA浓缩。部分机型还集成冷凝捕集功能，实现有机溶剂安全回收，满足GLP实验室规范要求。

离心浓缩仪凭借其温和高效的特性，已成为分子生物学实验中核酸（DNA/RNA）浓缩纯化的关键设备，其应用优势及技术要点如下：

1、活性保护

• 低温（30-40℃）真空浓缩，避免核酸高温变性（如DNA断裂或RNA降解）；

• 对比传统乙醇沉淀法，回收率提升20%以上（文献数据）；

2、高通量处理

• 单次可并行处理48-180个微量样本（适配1.5mL离心管）；

• 自动化程序实现无人值守，节省60%操作时间；

3、兼容性广

• 适用于各类提取缓冲液（TE buffer、Tris-HCl等）及有机溶剂（异丙醇、乙醇）；

• 可浓缩pg级至μg级核酸，满足NGS、PCR等下游实验需求；

以DNA浓缩为例，离心浓缩仪操作主要步骤如下：

一、实验前准备

1、设备与耗材

○离心浓缩仪（预冷至4℃）

○1.5/2.0 mL耐有机溶剂离心管（推荐RNase/DNase-free）

○真空泵油（确保液位达标）

○冷阱

2、样品预处理

○检测DNA初始浓度（Nanodrop A260/A280应为1.8-2.0）

○若含高盐（如NaCl＞200 mM），用TE buffer稀释10倍

二、分装与装载

1、分装样品

将DNA溶液（≤1.5 mL/管）对称装入离心转子，平衡误1差＜0.1 g。

2、参数设置

三、浓缩过程监控

1、实时观察

通过观察窗确认无液体飞溅（若发生，立即暂停并检查平衡），冷凝管结霜量＞50%需暂停除霜。

2、终点判断

自动模式：仪器检测到真空度稳定（ΔP＜5 mbar/5min）

手动模式：目测管底出现1-2 μL液滴

四、终止与回收

1、停机步骤

先关闭加热模块，再缓慢泄真空（速率≤10 mbar/s），最后停止离心。

2、样品处理

立即用20 μL TE buffer重悬DNA（轻柔吹吸10次），短暂离心（1000g×30s）收集管壁残留。

五、质量控制

1、浓度检测

Qubit定量（比Nanodrop更准确）

琼脂糖凝胶电泳（验证无降解）

2、设备维护

用10%乙醇擦拭转子及腔体

真空泵油变色（＞200小时）需更换

富睿捷真空离心浓缩设备可同时处理多个样品，无需担心交叉污染。系统内程序可设定至多30个，主机配备样品在线成像系统，可在运行过程中观察样品浓缩状态，并根据不同的样品对整机的真空度进行调节。设备采用皮拉尼真空计可实时显示腔体内的真空度，并保证真空度的真实性。根据不同的样品可对整机转速进行调节。